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  2. CCK8細胞增殖毒性檢測試劑盒

    更新:2022-10-27 11:04:20

    中文名:CCK8細胞增殖毒性檢測試劑盒說明書下載暫無
    英文名:Cell Counting Kit-8
    描述:Cell Counting Kit-8,簡稱CCK-8試劑盒或CCK8試劑盒,是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。
    訂購信息
      貨號規格價格品牌
      CKK8-100T100T85GBCBIO
      CKK8-500T500T380GBCBIO
      CKK8-5000T5000T2280GBCBIO
    產品介紹

      產品簡介:

      Cell Counting Kit-8,簡稱CCK-8試劑盒或CCK8試劑盒,是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

      產品特點:

      使用水溶性四唑鹽與水溶性甲臜染料,因此無需DMSO換液操作步驟。

      與其他水溶性四唑鹽法(XTT,MTS)相比,靈敏度更高的同時毒性更低

      方便:單一溶液無需其他試劑

      酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響

      儲存和穩定性:

      4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效。

      試劑盒組成:

      次數

      CKK8-100T

      CKK8-500T

      CKK8-5000T

      CCK8 Solution

      1ml

      5ml

      50ml

      說明書

      1

      1

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      注意事項:

      本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶的催化反應,因此當檢測體系中有還原性物質存在時,會干擾測定。

      由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發問題。

      用酶標儀檢測之前,要確保每個孔內沒有氣泡,否則會影響測定。

      加入 CCK-8 試劑后,培養時間要根據不同的細胞種類、數量和細胞狀態來確定。通常情況下, 相同的培養時間,懸浮細胞和貼壁細胞相比,吸光度較低,可以延長培養時間或者增加細胞數 量。此外,白細胞可能也需要較長的培養時間。

      本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。

      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


      使用說明:

      1.       使用與酶標儀相匹配的 96 孔培養板。通常進行細胞增殖實驗時,每孔加 100 微升 2000 個細胞,而測定細胞毒性時,每孔加100微升5000個細胞,應根據所用的細胞類型、增殖速度進行調整。注意設置 2-3個重復孔,并按照實驗需要設置實驗組與對照組,按要求進行培養并給予特定的藥物刺激。

      2.       處理結束后,向每孔加入 10μl CCK-8試劑(如果起始的培養體積為200微升,則需加入20微升CCK-8溶液)?梢杂眉恿讼鄳考毎囵B液和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。如果擔心所使用的藥物會干擾檢測,需設置加了相應量細胞培養液、藥物和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。

      3.       37 oC培養箱內孵育0.5-4小時,培養時間的長短依據細胞種類、數量、活力等情況而定,大多數情況孵育1小時即可。初次實驗者,可以選擇幾個不同的培養時間點如 0.5h, 1h, 2h, 4h 用酶標儀進行檢測,以便選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續實驗。

      4.       在 450nm 測定OD吸光度并進行計算。如無 450nm 濾光片可用 430-490nm 范圍內的濾光片。注意:若樣品為渾濁的細胞懸液時,可以選用大于 600nm 的波長,如 650nm 作為參比波長進行雙波長測定。 注意:用酶標儀檢測之前,要確保每個孔內沒有氣泡,否則會影響測定。

      5.       結果判斷:細胞增殖或毒性=100% × (OD實驗-OD空白) / (OD對照-OD空白)

      OD實驗:實驗孔(含有細胞的培養基、CCK-8、待測物質)

      OD空白:空白孔(不含細胞和待測物質的培養基、CCK-8)

      OD對照:對照孔(含有細胞的培養基、CCK-8、沒有待測物質)


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